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2025
5-6胰蛋白酶(Trypsin)是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段,水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),破壞細(xì)胞間的連接,從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH8.0和37℃時,胰酶的作用能力最-強(qiáng),因此使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。由于EDTA能夠螯...
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5-6青霉素-鏈霉素(Penicillin-StreptomycinSolution)混合液,通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染最-常用的抗生素,常配制成100倍濃度母液使用。其中,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染,但青霉素溶液對溫度和酸堿度較為敏感,室溫易降解,需冷凍保存...
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4-29DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營養(yǎng)成分,含有多種微量元素,廣泛應(yīng)用于多種哺乳類細(xì)胞的培養(yǎng)。同時,DMEM/F12培養(yǎng)基常作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ),也適用于低血清含量下哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。DMEM/F12培養(yǎng)基成分說明形態(tài)液體濃度1×規(guī)格500mLpH7.2-7...
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4-29McCoy's5A培養(yǎng)基是ThomasMcCoy等人在1959年設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,最初專門用于NovikoffHepatoma細(xì)胞的培養(yǎng)。McCoy's5A培養(yǎng)基是改良的BasalMedium5A,與其他培養(yǎng)基不同的是,McCoy's5A含有還原型谷胱甘肽、細(xì)菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖。McCoy's5A廣泛用于多種類型的原代細(xì)胞的培養(yǎng),如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網(wǎng)膜等。此外McCoy's5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng)、細(xì)胞建系,以及一些淋巴細(xì)胞和較難培養(yǎng)的細(xì)胞的培...
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4-29Ham'sF-12K培養(yǎng)基是Ham'sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn's改進(jìn)型,在Ham'sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和丙酮酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham'sF-12K培養(yǎng)基最初設(shè)計(jì)用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。Ham'sF-12K細(xì)胞培養(yǎng)基含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。Ham'sF-12K培養(yǎng)基成分說明...
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4-29平衡鹽溶液(BalancedSaltSolution,BSS)也叫生理溶液(PhysiologicalSolution),是集緩沖液的緩沖力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體的,具有維持滲透壓、保持pH穩(wěn)定以及提供簡單的營養(yǎng)的作用,可滿足體外實(shí)驗(yàn)中組織、器官或細(xì)胞的生存和代謝的基本需要。一些平衡鹽溶液中還添加了少量酚紅,用以指示溶液的酸堿度變化。DPBS全稱Dulbecco'sPhosphate-BufferedSaline,中文名稱杜氏磷酸緩沖鹽溶液,是生物化...
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4-28MEM培養(yǎng)基(MinimumEssentialMedium)也稱最-低必需培養(yǎng)基、最小基本培養(yǎng)基或低限-量Eagle培養(yǎng)基,由HarryEagle在Eagle基本培養(yǎng)基(BEM)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的,是一種最基本、適用范圍最-廣的培養(yǎng)基,是動物細(xì)胞培養(yǎng)中最-常用的培養(yǎng)基之一。MEM培養(yǎng)基僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,成分簡單,主要用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),配方修改后也可用于其他類型細(xì)胞培養(yǎng)。MEM含NEAA(非必須氨基酸)的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨...
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4-28RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy's5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基最初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和癌細(xì)胞的培養(yǎng),尤其是懸浮細(xì)胞的...
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