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直播答疑 | 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境要求和監(jiān)測(cè)方法

更新時(shí)間:2024-08-29  |  點(diǎn)擊率:548


普諾賽直播課

在8月20日普諾賽直播間中,左明祥老師為大家?guī)?lái)了《細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境要求和監(jiān)測(cè)方法》的專題課程。

直播回放路徑

①可在“武漢普諾賽"微信視頻號(hào)查看;

B站搜索“普諾賽生物",點(diǎn)擊最新視頻觀看學(xué)習(xí)。


每一份好奇心都是推動(dòng)科學(xué)進(jìn)步的力量,針對(duì)大家在直播中提出的問(wèn)題,我們特意邀請(qǐng)左老師為大家進(jìn)行深入解答。


另外,我們誠(chéng)摯地歡迎大家在評(píng)論區(qū)暢所欲言。無(wú)論是實(shí)驗(yàn)技術(shù)問(wèn)題還是感興趣的課程主題,我們都將傾聽(tīng)您的每一個(gè)意見(jiàn)并積極回應(yīng),也會(huì)根據(jù)大家的需求定制專題講座。感謝您的參與和關(guān)注!






直播問(wèn)題解答


問(wèn)

過(guò)濾器和水盤如何清潔?

在正常情況(未出現(xiàn)污染)下,培養(yǎng)箱的水盤應(yīng)使用75%酒精擦拭消毒,然后加入無(wú)菌水并添加適量的抑菌劑當(dāng)培養(yǎng)箱出現(xiàn)污染時(shí),可以使用新潔爾滅消毒液或3%的過(guò)氧化氫消毒液對(duì)水盤進(jìn)行消毒,消毒時(shí)間為30 min。此外,也可以使用紫外燈進(jìn)行消毒處理,消毒完成后用無(wú)菌水擦拭干凈,添加無(wú)菌水和抑菌劑后正常使用。

培養(yǎng)箱內(nèi)的HEPA過(guò)濾器一般不需要單獨(dú)清潔,當(dāng)使用出現(xiàn)異常時(shí)可以進(jìn)行更換(需要專業(yè)維修人員更換)。對(duì)于超凈工作臺(tái)和生物安全柜中的過(guò)濾器,只需根據(jù)實(shí)際使用情況,定期(半年至一年)更換初效濾網(wǎng)即可。

問(wèn)

消毒時(shí)間多久合適?

使用消毒液消毒,時(shí)間30 min左右即可;若使用的消毒液存在腐蝕性,應(yīng)在消毒完成后使用無(wú)菌水將消毒液擦拭干凈。使用臭氧或紫外燈的消毒時(shí)間一般也是30 min。

問(wèn)

怎樣檢測(cè)二氧化碳泄漏?

如果需要檢測(cè)泄漏至空氣中的CO2濃度,防止其濃度過(guò)高可能引發(fā)的窒息風(fēng)險(xiǎn),可以使用專門的CO2濃度檢測(cè)儀,或者使用氧氣濃度監(jiān)測(cè)儀(適用于多種氣體環(huán)境,如含CO2或氮?dú)獾模?/p>

如果是要檢測(cè)管道泄漏的位置,初步的檢查方法可以是使用肥皂水在管道的接頭位置進(jìn)行涂抹,觀察是否出現(xiàn)氣泡;如需要準(zhǔn)確檢測(cè),則需專業(yè)人員使用專業(yè)檢測(cè)工具進(jìn)行檢測(cè)。

問(wèn)

細(xì)胞培養(yǎng)間的實(shí)驗(yàn)服怎么消毒和存放比較合適?

實(shí)驗(yàn)服在清洗完成之后,可以放在專用的滅菌袋中,再放進(jìn)高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理。滅菌完成后,將實(shí)驗(yàn)服連同滅菌袋一起放入烘箱中烘干備用。

問(wèn)

臭氧消毒適用于什么實(shí)驗(yàn)室?

臭氧消毒適用于配套有新風(fēng)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室。臭氧一般需要通過(guò)新風(fēng)系統(tǒng)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室空間,并在空間內(nèi)達(dá)到一定濃度才能起到較好的消毒效果。消毒完成之后,也需要通過(guò)新風(fēng)系統(tǒng)將殘留的臭氧排出實(shí)驗(yàn)室,否則會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境產(chǎn)生影響。

問(wèn)

支原體檢測(cè)沒(méi)有污染,但細(xì)胞狀態(tài)不好,考慮什么污染呢?

細(xì)胞狀態(tài)不好的因素有很多,首要且關(guān)鍵的一步是排除污染因素。如果通過(guò)各種檢測(cè)手段(細(xì)菌、真菌通過(guò)瓊脂板或空培檢測(cè),支原體使用試劑盒檢測(cè))都無(wú)法檢測(cè)到污染,則可能不是因污染導(dǎo)致的。

如果仍懷疑存在污染,可以嘗試向培養(yǎng)物中添加適當(dāng)濃度的廣譜抗生素。如果添加抗生素后細(xì)胞狀態(tài)明顯好轉(zhuǎn),說(shuō)明確實(shí)存在某種難以檢測(cè)的微生物影響細(xì)胞狀態(tài);如果添加抗生素后細(xì)胞狀態(tài)未出現(xiàn)好轉(zhuǎn)甚至更差,則需從其他方面排查細(xì)胞狀態(tài)不好的原因,如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件、細(xì)胞特性或外部操作因素等。




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